不同細(xì)胞計(jì)數(shù)原理及應(yīng)用
在生命科學(xué)領(lǐng)域不斷蓬勃發(fā)展的當(dāng)下,細(xì)胞計(jì)數(shù)儀作為科研與醫(yī)療實(shí)踐中的關(guān)鍵工具,其重要性日益凸顯。從基礎(chǔ)的生物學(xué)研究到前沿的醫(yī)療診斷,再到蓬勃興盛的生物制藥行業(yè),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀始終發(fā)揮著不可或缺的作用,為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的***獲取與深入分析奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
細(xì)胞計(jì)數(shù)是指通過測量單位體積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)(如細(xì)胞數(shù)/mL)來確定濃度,其核心在于將已知小體積的細(xì)胞懸液樣本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并換算。該技術(shù)在醫(yī)學(xué)診斷、細(xì)胞治療、實(shí)驗(yàn)研究以及環(huán)境檢測等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用。
01 常見細(xì)胞計(jì)數(shù)方法的優(yōu)缺點(diǎn)及應(yīng)用方向 手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)法 ? 原理:使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下直接觀察并計(jì)數(shù)細(xì)胞 ? 優(yōu)點(diǎn):成本低,操作簡單,可以直觀觀察細(xì)胞形態(tài) ? 缺點(diǎn):耗時(shí)長,易受人為誤差影響,重復(fù)性差,不適合高通量樣本 ? 適用方向:適用于小規(guī)模實(shí)驗(yàn)室、細(xì)胞培養(yǎng)維護(hù)、簡單的細(xì)胞計(jì)數(shù)需求 基于圖像的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 ? 原理:通過光學(xué)系統(tǒng)拍攝細(xì)胞圖像,利用軟件算法識(shí)別和統(tǒng)計(jì)細(xì)胞 ? 優(yōu)點(diǎn):操作簡便,計(jì)數(shù)速度快,可提供細(xì)胞大小、形狀等信息 ? 缺點(diǎn):難以計(jì)數(shù)低濃度細(xì)胞,對(duì)細(xì)胞成團(tuán)或形狀不規(guī)則的樣本計(jì)數(shù)精度有限 ? 適用方向:適用于大多數(shù)細(xì)胞類型,尤其是需要快速、高通量計(jì)數(shù)的場景 電阻抗法細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 ? 原理:基于庫爾特原理測量細(xì)胞通過微孔時(shí)引起的電阻變化 ? 優(yōu)點(diǎn):計(jì)數(shù)速度快,不受細(xì)胞顏色或折射率影響,能計(jì)數(shù)所有顆粒 ? 缺點(diǎn):不能區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞,無法計(jì)數(shù)成團(tuán)細(xì)胞 ? 適用方向:常用于醫(yī)院全血細(xì)胞計(jì)數(shù) 流式細(xì)胞儀 ? 原理:利用熒光檢測技術(shù),對(duì)細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)分析 ? 優(yōu)點(diǎn):可同時(shí)分析細(xì)胞大小、細(xì)胞周期、蛋白質(zhì)表達(dá)等,能區(qū)分不同細(xì)胞類型 ? 缺點(diǎn):設(shè)備昂貴,操作復(fù)雜,需要專業(yè)人員 ? 適用方向:主要用于復(fù)雜的細(xì)胞分析和研究,如細(xì)胞分選、細(xì)胞功能研究 間接細(xì)胞計(jì)數(shù)法(MTT/CCK8) ? 原理:通過檢測細(xì)胞代謝活性來間接反映細(xì)胞數(shù)量 ? 優(yōu)點(diǎn):不需要直接計(jì)數(shù)細(xì)胞,操作相對(duì)簡單 ? 缺點(diǎn):只能間接反映細(xì)胞數(shù)量,對(duì)細(xì)胞代謝活性有要求 ? 適用方向:適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性等實(shí)驗(yàn) 02 細(xì)胞計(jì)數(shù)常見的應(yīng)用場景 實(shí)驗(yàn)名稱 使用功能 應(yīng)用場景 實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化 細(xì)胞計(jì)數(shù) 在細(xì)胞傳代/凍存等實(shí)驗(yàn)中,需要計(jì)算細(xì)胞數(shù)量,使得培養(yǎng)皿以及凍存管中的細(xì)胞數(shù)量***致,以便后續(xù)研究。 細(xì)胞生長監(jiān)控 在細(xì)胞增殖過程中,檢測細(xì)胞增殖的速率變化,以獲得***佳的細(xì)胞收獲時(shí)間。如工業(yè)中常用到的CHO細(xì)胞產(chǎn)生蛋白類藥物,就需要監(jiān)控細(xì)胞增殖的情況。 細(xì)胞治療 和再生醫(yī)學(xué) 準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)于制備合適劑量的細(xì)胞制劑至關(guān)重要。確保每次治療中使用的細(xì)胞數(shù)量***致,有助于提高治療效果和安全性。 藥物篩選 和毒性測試 在藥物研發(fā)過程中,細(xì)胞計(jì)數(shù)用于評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞的影響。通過比較處理組和對(duì)照組的細(xì)胞數(shù)量,可以判斷藥物的有效性和毒性。 細(xì)胞活力評(píng)估 臺(tái)盼藍(lán) 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,檢測細(xì)胞的活力情況。 03 Leap-Count 100/100A 概覽 Leap-Count 100/100A細(xì)胞計(jì)數(shù)儀依托于先進(jìn)的光學(xué)成像技術(shù)和智能圖像識(shí)別技術(shù),可以提供細(xì)胞總數(shù)、細(xì)胞濃度、活死細(xì)胞比例、細(xì)胞平均直徑、平均圓度、結(jié)團(tuán)率、細(xì)胞形態(tài)學(xué)等全方位的細(xì)胞相關(guān)信息。所有數(shù)據(jù)結(jié)果自動(dòng)儲(chǔ)存,并通過多種格式輸出,滿足實(shí)驗(yàn)的各種需求。Leap-Count 100/100A在細(xì)胞濃度測試以及活力測試過程線性R2均大于0.99。 目前已驗(yàn)證過的細(xì)胞類型