人-鼠嵌合抗體：利用DNA重組技術(shù)將鼠源單抗的輕鏈、重鏈可變區(qū)插入含有人抗體恒定區(qū)的表達載體中，轉(zhuǎn)化哺乳動物細胞進行表達所產(chǎn)生的單克隆抗體。人-鼠嵌合抗體的人源化程度可達到70%，完整的保留了鼠源單抗的可變區(qū)及親本活性，人抗體恒定區(qū)的引入則降低了免疫原性。

人鼠嵌合抗體基本原理是從分泌某種鼠單抗的雜交瘤細胞基因組中分離并鑒定出重排的功能性鼠VL（輕鏈可變區(qū)）和VH（重鏈可變區(qū)），經(jīng)過基因重組分別與人的CL（輕鏈恒定區(qū)）和CH（重鏈恒定區(qū)）區(qū)基因按照***定的方式相拼接，克隆到表達載體中構(gòu)建鼠/人輕重鏈基因表達載體，并轉(zhuǎn)入適當?shù)乃拗骷毎磉_來制備特異性嵌合抗體。

對于其他類型的人源化抗體，其優(yōu)勢在于，技術(shù)路線簡單，易于操作；抗體完整性好，在體內(nèi)滯留時間長；鼠源抗體的親和力和特異性都得到保留，在臨床上得到了良好的反應。

構(gòu)建人鼠嵌合抗體主要包括：克隆鼠抗體可變區(qū)基因，釣取人抗體恒定區(qū)基因，拼接鼠抗體可變區(qū)基因與人抗體恒定區(qū)基因以及構(gòu)建載體和宿主細胞。

人鼠嵌合型單克隆抗體制備優(yōu)點：

①不僅保留了親本鼠抗體的高特異性和親和力，而且使鼠源性成分減少 70%左右；

②其人源Fc 段能有效介導生物學效應功能，如抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用（Antibody dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）、補體依賴性細胞毒作用（Complement dependent cytotoxicity，CDC）等；

③能自由地選擇抗體的型、亞型、類、亞類、大小、結(jié)構(gòu)域及添加糖基化位點等，以利用其不同的生物學特點及理化特性；

④由高效真核表達載體和人抗體恒定區(qū)組成的嵌合抗體表達“盒子”可以容許插入不同的鼠單克隆抗體的可變區(qū)，縮短操作和研制周期；

⑤操作相對簡單。

嵌合抗體主要有三種類型：

1、嵌合IgG抗體

目前嵌合抗體的研究主要集中在嵌合IgG（Immunoglobulin G）抗體。其構(gòu)建基本原理是從生產(chǎn)某種鼠源單克隆抗體的雜交瘤細胞中得到目的抗體V區(qū)（variable region）基因，再與人類的C區(qū)（constant region）基因重組并克隆到合適載體中，然后轉(zhuǎn)入受體細胞表達（如圖1）。

在構(gòu)建嵌合抗體時應根據(jù)不同目的選擇不同的C片段。這是因為不同類型的人抗體C區(qū)與補體和Fc（fragment crystallizable,Fc）相互作用的能力以及引發(fā)細胞溶解的功能不盡相同。在體內(nèi)免疫系統(tǒng)中，抗體的Fc段和效應細胞相互作用，發(fā)揮特異的生物學功能。例如IgE（Immunoglobulin E）可介導炎癥反應等，IgM活化補體的能力強，IgG1的補體活化能力比IgG3強，且在ADCC作用（antibody dependent cell mediated cytotoxicity）觸發(fā)能力上也比IgG3強。在與Fc受體的結(jié)合能力上IgG1和IgG3比較強，IgG4次之，而IgG2幾乎檢測不到。

2、嵌合Fab和F(ab')2抗體

嵌合Fab（antigen-binding fragment, Fab）和F(ab')2（具有兩個抗原結(jié)合表位的片段）抗體的優(yōu)勢就是滲透力強。Fab嵌合抗體制備原理為：將功能性抗體L,H鏈的V區(qū)基因與人的輕鏈k和H鏈CH1進行重組，克隆到表達載體中，在轉(zhuǎn)入宿主細胞表達。不過對于大多數(shù)該類型的抗體來說，由于親和力較低，分子量小，容易被腎小球過濾而從血液中消失，因此大多數(shù)不適合單獨使用于臨床治-療。

(文章來源于儀器網(wǎng))